产品简介

细胞与外基质相互作用产生的主动作用力被称为牵引力,其表征可通过牵引力显微镜(TFM)技术实现。该技术通过测量细胞外弹性基质的变形来获取应变场,并利用反演算法重构细胞所产生的牵引力。这为探究由牵引力失衡导致的疾病(如癌症、组织纤维化、动脉粥样硬化等)的机理、诊断与治疗提供了重要的理论支撑和检测、治疗依据。此外,该系统在揭示细胞与胞外基质相互作用所产生的细胞牵引力与细胞增殖、分化、凋亡以及胚胎发育、组织形成、伤口愈合等方面的密切关系,以及在单细胞水平上定量研究细胞迁移(收缩)过程中牵引力的时空分布规律,具有重要的生理病理意义。

通过图像处理技术获取微柱形变大小,可精确量化每根微柱产生的力微柱材料、直径、弹力范围、高度、排列及间距均可按需定制,满足多样化的实验需求。

微柱表面可包被标准蛋白如纤连蛋白或丨型胶原,同时提供定制其他包被蛋白的服务,以适应不同细胞类型和研究需求。

 

测量原理

未变形微柱在明场图片中呈较亮的圆形,周围是较暗的边,通过霍夫变换可得到其形

心。发生变形的微柱呈较暗的半月形,通过图像处理可得到微柱的形变大小(如下图)。

由于微柱刚度已知,所以进而可得到每根微柱产生的力。

典型应用

1、细胞迁移、细胞运动力

2、细胞的应变和应力分布

3、细胞牵引力、内源力(cell active force)

4、细胞自主收缩力等

 

相关参数

 

未变形微柱在明场图片中呈较亮的圆形,周围是较暗的边,通过霍夫变换可得到其形

心。发生变形的微柱呈较暗的半月形,通过图像处理可得到微柱的形变大小(如下图)。

由于微柱刚度已知,所以进而可得到每根微柱产生的力。

 

典型应用

1、细胞迁移、细胞运动力;

2、细胞的应变和应力分布;

3、细胞牵引力、内源力(cell active force);

4、细胞自主收缩力等

 

细胞分析容量 每张微柱阵列可分析120-150个细胞

阵列尺寸 3.2x3.2 mm

观测点数量 10x18个

每个观测点微柱数量 170个,按六边形排列

微柱直径 5um

微柱高度 12um

微柱中心间距 12um

微柱弹力范围 标准范围为1-3nN

包被材料 纤连蛋白或I型胶原,有其他需求可定制

 

TFM玻片接种培养说明

1、TFM玻片与细胞准备

将TFM玻片置于PBS溶液中保存。

以基础培养基复苏细胞,培养于T25培养瓶中,放入CO2培养箱。

待细胞贴壁,吸去基础培养基,用温热无菌PBS溶液冲洗两次。

2、细胞消化与终止

加入0.25%胰蛋白酶溶液1mL,置于CO2培养箱中3min。

加入2mL低浓度FBS培养基终止消化,轻轻吹打制成细胞悬液。

3、细胞离心与重悬

将细胞悬液分装于3个灭菌离心管,1200r/min离心3min。

吸去上清液,加入1mL低浓度FBS培养基,轻轻吹打重悬细胞。

4、细胞接种至微柱阵列

吸去玻底培养皿中的PBS溶液,加入2mL低浓度FBS培养基。

取0.2mL细胞悬液均匀滴在薄微柱阵列上方,制得细胞样品。

5、细胞培养与静息状态恢复

细胞样品培养24h后,更换为2mL无FBS培养基,继续培养10h。

6、显微镜观察、拍照与FBS刺激

在倒置显微镜下用40倍镜观察,调整焦平面使细胞轮廓和微柱形变清晰。

拍照记录静息状态细胞,加入0.2mL FBS。

设置显微镜摄像机每3s拍照一次,持续2min,观察细胞变化及微柱位移。

TFM牵引力显微镜玻片

细胞与外基质相互作用产生的主动作用力被称为牵引力,其表征可通过牵引力显微镜(TFM)技术实现。该技术通过测量细胞外弹性基质的变形来获取应变场,并利用反演算法重构细胞所产生的牵引力。
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